TRITC Phalloidin TRITC標記鬼筆環(huán)肽

產品標簽

Phalloidin 鬼筆環(huán)肽；F-actin 肌動蛋白（聚合）；G-actin 球形肌動蛋白（單體）；Actin Polymerization 肌動蛋白聚合；Cytochalasin細胞松弛素；CAS NO.：17466-45-4；

產品信息

【溫馨提示】：見我司整理的鬼筆環(huán)肽及衍生物（Phalloidin and Phalloidin Conjugates）產品專題。

產品描述

鬼筆環(huán)肽（Phalloidin），又稱鬼筆鵝膏素，zui初是從毒蘑菇鬼筆鵝膏（Amanita phalloides）中分離到的一種七肽毒素，以*的親和力和特異性結合肌動蛋白絲F-actin（聚合形式的肌動蛋白），不會結合單體肌動蛋白（G-actin）。不像肌動蛋白抗體，同時識別單體和聚合形式的肌動蛋白。鬼筆環(huán)肽對大小纖維的親和力相近，在許多不同的動植物物種的肌肉和非肌肉細胞中，基本都按照一個肌動蛋白亞基與一個鬼筆環(huán)肽分子的化學計量比結合。不像肌動蛋白抗體，對不同物種或來源的肌動蛋白親和力會發(fā)生明顯變化。鬼筆環(huán)肽的非特異性結合幾乎可忽略，染色和未染色區(qū)域的差異極其明顯。鬼筆環(huán)肽使得肌動蛋白聚合/解離的臨界濃度降至1μg/ml，可用作一種聚合增強劑。另外，產生的復合物高度穩(wěn)定（解離常數(shù)約3×10^–8 M），能夠抑制細胞松弛素、碘化*-鉀和溫度上升引起的去聚合和去組裝活性。

鬼筆環(huán)肽及其衍生物在納摩爾濃度即可對F-actin染色，且水溶性良好，是非常實用和方便的探針，對組織切片、細胞培養(yǎng)物或無細胞體系內的F-actin進行定性和定量研究。另外，鬼筆環(huán)肽及其衍生物很小，直徑約12–15 ?，分子量<2000 Da，經標記后的F-actin仍維持許多標記前的功能。比如，標記的甘油抽提肌纖維仍能收縮；標記的肌動蛋白絲仍能在固相肌球蛋白基質中移動。

本品為TRITC熒光標記的鬼筆環(huán)肽（TRITC-Phalloidin），以溶于甲醇的20µM儲存液形式提供，具體的工作濃度請參考文獻或自身實驗體系來調整，常用濃度范圍80-200nM。按照100nM的工作濃度來算，可進行300次細胞染色。

產品應用

1）對固定的組織切片和組織細胞培養(yǎng)物進行肌動蛋白絲（F-actin）的熒光染色；

2）體外制備穩(wěn)定的熒光肌動蛋白絲（F-actin）；

注意事項

1）本品（Cat# MX4405）以溶于甲醇的儲存液（20µM）形式提供，300T包裝，適合用量少的研究者；另提供凍干粉形式（Cat# MX4406），1mg包裝，相對更經濟，適合用量多的研究者；

2）本品具有一定的毒性，LD₅₀=2mg/kg，操作時請注意防護。

3）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

操作流程（免疫熒光染色）【詳見懋康整理】

有幾種方法都能用來染色組織細胞培養(yǎng)物內的肌動蛋白絲（F-actin）染色，其中，固定步驟在獲得可信且具代表性的細胞F-actin分布情況中至關重要。固定步驟基于實驗自身需求來選擇。多聚甲醛或戊二醛都能得到優(yōu)秀的F-actin染色和良好的板狀偽足維持保存。

一、實驗材料準備

二、染色工作液準備

三、染色流程

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TRITC Phalloidin 鬼筆環(huán)肽 細胞染色

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