AO/EB雙染試劑盒 細(xì)胞增值
簡要描述：
AO/EB雙染試劑盒 細(xì)胞增值是一種異染的核酸結(jié)合染料，具細(xì)胞膜滲透性，通過插入或靜電吸引的方式與DNA或RNA結(jié)合。當(dāng)與雙鏈DNA（dsDNA）結(jié)合發(fā)射綠色熒光（Ex/Em=502/525nm），與單鏈DNA（ssDNA）或RNA結(jié)合發(fā)射紅色熒光（Ex/Em=460/650nm），少量結(jié)合呈橙紅色熒光。
產(chǎn)品時間：2024-11-04
打印當(dāng)前頁AO/EB Double Staining Kit AO/EB雙染試劑盒
關(guān)鍵詞：
吖啶橙（Acridine Orange，AO）；溴化乙錠（Ethidium Bromide, EB）；Apoptotic cell 凋亡細(xì)胞；Necrotic cells壞死細(xì)胞；Annexin V/PI 細(xì)胞凋亡雙染；
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
AO/EB Double Staining Kit AO/EB雙染試劑盒 | MX3249-100T | 100T | 220 |
產(chǎn)品描述
吖啶橙（Acridine Orange，AO）是一種異染的核酸結(jié)合染料，具細(xì)胞膜滲透性，通過插入或靜電吸引的方式與DNA或RNA結(jié)合。當(dāng)與雙鏈DNA（dsDNA）結(jié)合發(fā)射綠色熒光（Ex/Em=502/525nm），與單鏈DNA（ssDNA）或RNA結(jié)合發(fā)射紅色熒光（Ex/Em=460/650nm），少量結(jié)合呈橙紅色熒光。溴化乙錠（Ethidium Bromide, EB）是一種多環(huán)芳烴熒光小分子和核酸插入劑，嵌合到雙鏈DNA或RNA的堿基對內(nèi)，無堿基特異性，呈紅色熒光（（Ex/Em=518/605nm）。EB不具細(xì)胞膜滲透性。
吖啶橙（AO）和溴化乙錠（EB）常常聯(lián)合使用來觀察細(xì)胞核變化和凋亡小體形成，這些都是凋亡的特征。兩者結(jié)合能區(qū)分活細(xì)胞、凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞。工作原理在于吖啶橙能同時染活細(xì)胞和死細(xì)胞，EB只能對喪失膜完整性的細(xì)胞進(jìn)行染色?；罴?xì)胞呈均勻的綠色。早期凋亡細(xì)胞呈綠色，并且在細(xì)胞核能看到亮綠色的點，由于染色體濃縮和核斷裂。晚期凋亡細(xì)胞也會被EB著色，從而染成橙紅色，但，與壞死細(xì)胞相比，晚期凋亡細(xì)胞會有濃縮和常常斷裂的核。壞死細(xì)胞也被染成橙紅色，但會有和活細(xì)胞相似的核形態(tài)，沒有濃縮的染色體。
我司（懋康生物）提供的AO/EB雙染試劑盒（AO/EB Double Staining Kit）提供完整的試劑，操作簡單，根據(jù)說明書操作能做100個反應(yīng)。
產(chǎn)品包裝
編號 | 組分名稱 | 保存方法 | 貨號（規(guī)格） |
MX3233-20T | |||
MX3249-A | AO Stain Solution 吖啶橙染液 | 4℃避光 | 200μl |
MX3249-B | EB Stain Solution 溴化乙錠染液 | 4-25℃避光 | 200μl |
MX3249-C | Dilution Buffer 稀釋緩沖液 | 4℃避光 | 50ml |
注意事項
1）AO與EB都有一定毒性，請小心操作。
2）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 染色工作液的制備
于正式實驗前，取吖啶橙染液（試劑A）、溴化乙錠染液（試劑B）、稀釋緩沖液（試劑C），按照A:B:C=1:1:8的比例稀釋成所需的AO/EB染色工作液。
2. 細(xì)胞準(zhǔn)備
貼壁細(xì)胞：按照常規(guī)方法消化。于1000rpm離心5min，收集細(xì)胞沉淀，用PBS清洗一次。
懸浮細(xì)胞：于1000rpm離心5min，收集細(xì)胞沉淀，用PBS清洗一次。
之后用稀釋緩沖液（試劑C）重懸細(xì)胞，細(xì)胞計數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度為0.5-5×106個/ml。
3. 染色
每25μl細(xì)胞懸液中，加入2μl 新鮮制備的AO/EB染色工作液，輕輕混合均勻。室溫孵育5~10min。
4. 觀察
取干凈載玻片，滴加5~10μl 染色的細(xì)胞懸液，蓋上蓋玻片。使用熒光顯微鏡的熒光素濾片和60倍放大的物鏡來觀察和計數(shù)。該測定至少重復(fù)三次，每次觀察的總細(xì)胞至少100個。
【注意】：根據(jù)細(xì)胞類型選擇理想的物鏡放大倍數(shù)（更高或更低），前提是必須看清核形態(tài)。
應(yīng)用示例（來自文獻(xiàn)）：
文獻(xiàn)：Dual AO/EB Staining to Detect Apoptosis in Osteosarcoma Cells Compared with Flow Cytometry.
染色方法：Dual fluorescent staining solution (1 μl) containing 100 μg/ml AO and 100 μg/ml EB (AO/EB) was added to each suspension and then covered with a coverslip. The morphology of apoptotic cells was examined and 500 cells were counted within 20 min using a fluorescent microscope (OLYMPUS). Dual acridine orange/ethidium bromide (AO/EB) staining method was repeated 3 times at least.
Fig. (A) 陰性對照細(xì)胞（正常細(xì)胞）：環(huán)形細(xì)胞核均勻分布在細(xì)胞中央。(B)實驗組 (早期凋亡細(xì)胞): 吖啶橙（AO）染色后的細(xì)胞核呈黃綠色熒光，以月牙形或顆粒的形態(tài)聚集位于細(xì)胞的一邊。(C) 實驗組 (晚期凋亡細(xì)胞): 經(jīng)EB染色后的細(xì)胞核呈橙紅熒光，集中聚集且偏重定位。(D) 壞死細(xì)胞：壞死細(xì)胞體積增加，顯示平整的橙紅色熒光和不清晰的輪廓。細(xì)胞正要溶解或接近崩潰。
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貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
MF0756-1G | Ethidium Bromide (EB) 溴化乙錠 | 1g |
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— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務(wù)工作，主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
AO/EB雙染試劑盒 細(xì)胞增值
AO/EB雙染試劑盒 細(xì)胞增值