Enhanced Green Fluorescent Protein (EGFP)

重組增強型綠色熒光蛋白   《促xiao中》

產(chǎn)品標簽

DAF-2 DA；c；一氧化氮熒光探針；NO probe；Carboxy-PTIO一氧化氮清除劑；SNP硝普酸鈉；NOdonor；CAS：205391-02-2

產(chǎn)品信息

【溫馨提示】：可根據(jù)用戶需求提供定制包裝，歡迎洽談。

背景描述

綠色熒光蛋白（Green Fluorescent Protein, GFP），通常稱作增強型綠色熒光蛋白（Enhanced Green Fluorescent Protein, EGFP），廣泛使用的一種野生型綠色熒光蛋白（wt-GFP）變體。wt-GFP天然存在于水母（Aequorea victoria）中，1962年被Osamu Shimomura發(fā)現(xiàn)，鑒定為化學發(fā)光蛋白-水母發(fā)光蛋白（Aequorin）的伴侶蛋白。wt-GFP分子量為26,854.26 Da，等電點（PI）為5.80。wt-GFP具有一個次激發(fā)峰（波長：~490nm）和主激發(fā)峰（波長：395nm），兩個的發(fā)射峰都在505nm。wt-GFP的主要特征在于普遍用于生物化學和細胞生物學領域。wt-GFP具有du特的發(fā)光特性，不依賴任何輔因子或底物，只需分子氧。因此，常將wt-GFP和目的蛋白的基因融合表達，用來監(jiān)測目的蛋白表達或定位模式。

wt-GFP起初用作融合標簽普遍用在許多細胞生物學應用中，但仍存在一些明顯缺陷：①具有兩個激發(fā)峰（如上所述），490nm激發(fā)譜更適合成像用途，但表現(xiàn)出低振幅的短板。②生理溫度下蛋白折疊率相當?shù)?；③生色團成熟半衰期接近30min，限制了wt-GFP作為快速基因誘導的報告子。為了改進這些缺陷，分子生物學家開發(fā)出稱為增強型綠色熒光蛋白（EGFP）的wt-GFP變體，含Phe-64-Leu（F64L）和Ser-65-Thr（S65T）兩處突變。EGFP的分子量為26,897.43 Da，等電點（PI）為5.58。以單體形式存在，與wt-GFP的二級結(jié)構相同。S65T通過調(diào)控Glu22附近的離子態(tài)抑制395nm的主激發(fā)峰，使EGFP呈現(xiàn)出單一激發(fā)峰增（~490nm）。F64L提高蛋白在37℃的折疊率。重要的是，EGFP的密碼子序列優(yōu)化后更適合在哺乳動物細胞內(nèi)表達。

產(chǎn)品描述

本品是在大腸桿菌內(nèi)重組表達的非糖基化、同型二聚體蛋白。經(jīng)親和純化所得，不僅純度高，且熒光信號強。重組EGFP分子量為26.9kDa，由239個氨基酸構成，C端帶His標簽，在WB分析中可通過GFP抗體和His-tag抗體來檢測。Ex/Em=488/509nm。重組EGFP是一種多用途的生物標志物，用于監(jiān)測生理過程，觀察蛋白定位以及檢測體內(nèi)轉(zhuǎn)基因表達。

產(chǎn)品特性

1） 同義名：Recombinant Enhanced Green Fluorescent Protein; rEGFP; recombinant EGFP;

2） 來源：大腸桿菌

3） 標簽：His

4） 分子量：26.9 kDa

5） 外觀：粉末

6） 純度：≥95%（SDS-PAGE）

7） 溶解性：溶于水（1mg/ml）

8） 應用：用作GFP表達研究的對照品，包括：用作SDS-PAGE和WB分析的標準品、熒光計、流式細胞儀和熒光顯微鏡校準用、以及微注射進入細胞和組織等；偶聯(lián)到其它蛋白上 

保存與運輸方法

保存：-20oC避光干燥保存，1年有效。 

運輸：冰袋運輸。

產(chǎn)品重溶

將低溫保存的凍干產(chǎn)品置于室溫充分回溫，低速離心到管底，之后加入無菌去離子水配制成儲存液（0.5-1mg/ml），≤-20℃分裝避光保存?？杉尤胼d體蛋白（比如：0.1% BSA或HSA）延長保存周期，盡量避免反復凍融次數(shù)?！咀⒁狻浚罕緝龈煞鄯菬o菌，若需嚴格無菌，可通過低蛋白吸附力的濾膜過濾除菌，再使用。

注意事項

1） 我司可定制生產(chǎn)低內(nèi)毒素的重組EGFP（起始定制量100μg）。

2)為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

附錄I.熒光活性

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。

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