Glycogen (5mg/ml), Molecular Biology Grade

核酸助沉劑糖原（5mg/ml）

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關鍵詞

Glycogen糖原；Nucleic acid coprecipitant核酸共沉淀劑；Inert carrier惰性載體；Linear Acrylamide線性丙烯酰胺；CAS：9005-79-2；

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產品描述

糖原（Glycogen）是動物細胞合成的葡萄糖分枝狀聚合物，用于能量儲藏和釋放。是淀粉類似物，結構與支鏈淀粉類似，用作二次長期儲能。用作核酸沉淀的載體物質。一種惰性載體，能明顯提高乙醇沉淀法中提取DNA和RNA的回收率。糖原不溶于乙醇，形成捕獲目的核酸的沉淀。離心后形成肉眼可見沉淀，從而使得處理沉淀下來核酸變得更為方便。與傳統(tǒng)的tRNA輔助沉淀法相比，糖原從稀釋溶液中沉淀核酸量效率更高。另外，由于糖原本身不含DNA或RNA，用其沉淀所得的核酸更適合用于后續(xù)的PCR、RT-PCR以及內切酶等核酸酶反應。

本品為糖原溶液，濃度為5mg/ml，不含DNase和RNase，達分子生物學級別。適用于DNA或RNA沉淀用的輔助沉淀劑，通常每4~5μl糖原（5mg/ml）可把pg級的DNA或RNA從1ml溶液體系中沉淀出來。

保存與運輸方法

保存：-20℃保存，至少1年有效。 

運輸：冰袋運輸。

注意事項

1）對于單次用量比較少的用戶，建議收到本品第一次使用時，小量分裝凍存，減少反復凍融次數(shù)。

2）有文獻報道，經糖原沉淀的連接反應產物，幾乎不會干擾后續(xù)的細菌轉化。糖原（1μg/ml）不會抑制TdT活性，糖原（＜2mg/ml）幾乎不會影響反轉錄酶活性，糖原（0.02mg/ml）不會抑制T4 RNA連接酶活性。

3）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法【適用于稀釋溶液中沉淀DNA】

【注①】：以下步驟適用于DNA沉淀，對于RNA沉淀需特別注意使用無RNA酶的吸頭、離心管和水。

【注②】：以下步驟僅做參考，請根據(jù)實際實驗需求和方法來優(yōu)化糖原的工作濃度以及相應步驟。

1）往DNA溶液中加入1/10體積的3M乙酸鈉（或2M氯化鈉，或5M乙酸銨）。

2）加入糖原（5mg/ml）使其終濃度為0.02~1mg/ml。

【注①】：糖原的工作濃度請參考文獻或特定的操作說明進行。對于寡核苷酸，建議工作濃度不要超過1mg/ml。

3）加入1倍體積的異丙醇（或2.5倍體積的乙醇）到溶液內，輕輕混勻。＜200bpDNA片段需用乙醇。

4）于-20℃孵育混合物60min，或-70℃孵育30min。更長的孵育時間和更低溫度能產生更好的核酸回收率。

5）10,000rpm離心混合物10~15min。

6）吸走上清。

7）用70%冰乙醇清洗沉淀。

8）晾干沉淀。避免過度晾干沉淀，否則需花費更長時間來溶解。

9）用不含核酸酶的水（#MF0416-100ML）或TEbuffer（# MS3534-500ML）來溶解DNA。

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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